Anti D Blend (IgM+IgG)
Anti  D ﺣﺎﺿﺮ ﻣﺨﻠﻮطی از دو آنتی ﺑﺎدی ﻣﻮﻧﻮکلوﻧﺎل اﻧﺴﺎنی از کلاس IgM و IgG می ﺑﺎﺷﺪ. Anti  D ترکیبی ،ﺑـﻪ ﻋﻠﺖ وﺟﻮد آنتیﺑﺎدی IgG میﺗﻮاﻧﺪ در آزﻣﻮن آنتی گلبوﻟﯿﻦ ﻏﯿﺮﻣﺴﺘﻘﯿﻢ ﻣﻮرد اﺳـﺘﻔﺎده ﻗـﺮار گیرد. اﯾـﻦ آﻧﺘـیﺑـﺎدی ﻣﻮﻧﻮکلوﻧﺎل ﺗﺮکیبی، ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﻣﺸﺨﺺ ﻧﻤﻮدن اﻧﻮاع ﺿﻌﯿﻒ آنتی ژن Du) D) ﻧﯿـﺰ اﺳـﺘﻔﺎده ﻣـی گـﺮدد. اﯾـﻦ ﺗﺮکیب ﻫﯿچگونه واکنش ﻣﺘﻘﺎﻃﻊ و آگلوﺗﯿﻨﺎﺳﯿﻮن ﻏﯿﺮ اﺧﺘﺼﺎصی ﺑﺎ گلبول ﻗﺮﻣﺰD ﻣنفی اﯾﺠﺎد نمی کند.

آزمایش با روش اسلاید:  

1. ﯾک ﻗﻄﺮه از ﺳﻮﺳپانسیون ﺳﻠولی 40%را روی ﻻم ﺗﻤﯿﺰ ﻗﺮار دﻫﯿﺪ.
2. ﯾک ﻗﻄﺮه از ﻣﻌﺮف Anti D Blend را ﺑﻪ آن اﺿﺎﻓﻪ ﻧﻤﺎﯾﯿﺪ.
3. ﺑﺎ اپلیکاﺗﻮر و ﺳپس ﺣﺮکت چرخشی ﻻم، ﻣﺤﺘﻮای آن را ﺑﻪ ﺧﻮبی ﻣﺨﻠﻮط کنید.
4. ﻧﺘﯿﺠﻪ را پس از 20 ﺛﺎﻧﯿﻪ الی 2 دﻗﯿﻘﻪ ﺑﺨﻮاﻧﯿﺪ.

آزمایش مستقیم با روش لوله:

1. گلبول ﻗﺮﻣﺰ را ﺑﺎ ﺳﺮمﻓﯿﺰﯾﻮﻟﻮژی (NaCl 0.9%) ﺳﻪ ﻣﺮﺗﺒﻪ ﺷﺴﺘﺸﻮ دﻫﯿﺪ.
2. از گلبولﻫﺎی ﺷﺴﺘﻪ ﺷﺪه ﺳﻮﺳپاﻧﺴﯿﻮن 5-2 درﺻﺪ در ﺳﺮم ﻓﯿﺰﯾﻮﻟﻮژی ﺗﻬﯿﻪ ﻧﻤﺎﯾﯿﺪ.
3. ﯾک ﻗﻄﺮه از ﻣﻌﺮف Anti D (Blend) را ﺑﻪ ﻟﻮﻟﻪ اﺿﺎﻓه کنید.
4. ﯾک ﻗﻄﺮه از ﺳﻮسپاﻧﺴﯿﻮن گلبولی ﺗﻬﯿﻪ ﺷﺪه را ﺑﻪ ﻟﻮﻟﻪ اﺿﺎﻓﻪ کرده و ﺑﻪ آرامی ﻣﺨﻠﻮط کنید.
5. ﻟﻮﻟﻪ را پس از ﻣﺨﻠﻮط کردن ﺑﻪ ﻣﺪت 30دﻗﯿﻘﻪ در دﻣﺎی اﺗﺎق ﻧگه دارﯾﺪ ﯾﺎ ﺑﺮای روش ﺳﺮﯾﻊ ، ﺑﻪ ﻣﺪت 30ﺛﺎﻧﯿﻪ ﺑـﺎ ﺳﺮﻋﺖ  3000rpm ﺳﺎﻧﺘﺮﯾﻔﯿﻮژ ﻧﻤﺎﯾﯿﺪ.
6. رﺳﻮب اﻧﺘﻬﺎی ﻟﻮﻟﻪ را ﺑﺎ ﺗکان دادن ﺑﻪ آرامی ﺟﺪا کنید.
7. ﻧﺘﯿﺠﻪ را ﺑﻪ ﺻﻮرت چشمی ﻗﺮاﺋﺖ کنید.
8. در ﺻﻮرت ﻋﺪم اﯾﺠﺎد آگلوﺗﯿﻨﺎﺳﯿﻮن، ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺟﺴﺘﺠﻮی آﻧتی ژنﻫﺎی ﺿﻌﯿﻒ Du) D)  آزﻣﺎﯾﺶکوﻣﺒﺲ (آزﻣﺎﯾﺶ آنتی گلبوﻟﯿﻦ ﻏﯿﺮﻣﺴﺘﻘﯿﻢ) را اﻧﺠﺎم دﻫﯿﺪ.

آزمایش آنتی گلبولین غیر مستقیم (تست کومبس):

1.ﻣﺮاﺣﻞ 4-1 آزﻣﺎﯾﺶ ﻣﺴﺘﻘﯿﻢ ﺑﺎ روش ﻟﻮﻟﻪ را اﻧﺠﺎم دﻫﯿﺪ.
2. ﻟﻮﻟﻪ را ﺑﻪ ﻣﺪت 30دﻗﯿﻘﻪ در دﻣﺎی37 درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘیگراد ﻗﺮار دﻫﯿﺪ.
3. ﻣﺨﻠﻮط ﺣﺎﺿﺮ را 3ﻣﺮﺗﺒﻪ ﺑﺎ ﺳﺮم ﻓﯿﺰﯾﻮﻟﻮژی ﺑﺸﻮﯾﯿﺪ و پس از آﺧﺮﯾﻦ ﺷﺴﺘﺸﻮ، ﻣﺎﯾﻊ رویی را کاﻣﻼ ً ﺗﺨﻠﯿﻪ کنید.
4. ﺑﻪ رﺳﻮب گلبولﻫﺎی ﻗﺮﻣﺰ ،2ﻗﻄﺮه آنتیﻫﯿﻮﻣﻦگلبوﻟﯿﻦ اﺿﺎﻓﻪ و ﻟﻮﻟﻪ را ﺑﻪ ﺧﻮبی ﺗکان داده و ﺑﻪ ﻣﺪت 30ﺛﺎﻧﯿـﻪ ﺑـﺎ ﺳﺮﻋﺖ 3000rpm ﺳﺎﻧﺘﺮﯾﻔﯿﻮژ کنید.
5.رﺳﻮب اﻧﺘﻬﺎی ﻟﻮﻟﻪ را ﺑﺎ تکان دادن ﺑﻪ آرامی ﺟﺪا کنید.
6. ﻧﺘﯿﺠﻪ را ﺑﻪ ﺻﻮرت چشمی ﻗﺮاﺋﺖ کنید.
7.در ﺻﻮرت ﻣنفی ﺑﻮدن ﻧﺘﯿﺠﻪ، یک ﻗﻄﺮه ﺳﻠﻮل ﺣﺴﺎسﺷﺪه  با IgG ، (ﺳﻠﻮل کنترل کوﻣﺒﺲ) ﺑﻪ ﻟﻮﻟﻪ اﺿﺎﻓﻪ کرده واﯾﺠﺎد آگلوﺗﯿﻨﺎﺳﯿﻮن را ﺑﺮرسی کنید.
8. در ﺻﻮرت ﺻﺤﺖ ﻋﻤلکرد آنتی ﻫﯿﻮﻣﻦ گلبوﻟﯿﻦ اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪه، ﺑﺎ اﻓﺰودن گلبولﻫﺎی ﻗﺮﻣﺰ ﺣﺴـﺎس ﺷـﺪه ﺑـﺎ IgG، آگلوﺗﯿﻨﺎﺳﯿﻮن اﯾﺠﺎد ﺧﻮاﻫﺪ ﺷﺪ.

احتیاط های لازم در حین استفاده:

1.از اﯾﺠﺎد آﺋﺮوﺳﻞ اﺟﺘﻨﺎب ﺷﻮد.
2. در دﻣﺎی8-2درﺟﻪ ﺳﺎنتیگراد ﻧگهداری ﺷﻮد.
3. ﻗﺒﻞ از اﺳﺘﻔﺎده ﺑﻪ ﻣﺪت ﻧﯿﻢ ﺳﺎﻋﺖ در دﻣﺎی اﺗﺎق نگهداری ﺷﻮد.
4.از ﻣﺼﺮف ﻣﻌﺮف ﺗﺎرﯾﺦ گذﺷﺘﻪ ﺧﻮدداری گردد.
5. در ﺻﻮرت ﻣﺸﺎﻫﺪه ﻫﺮ گوﻧﻪ کدورت از ﻣﺼﺮف ﻣﻌﺮف ﺧﻮدداری ﺷﻮد.
6.اﯾﻦ ﻣﻌﺮف ﻫﺎ ﺣﺎوی 0/1 درﺻﺪ ﺳﺪﯾﻢ آزاﯾﺪ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﺎده نگهدارﻧﺪه میﺑﺎﺷﻨﺪ، ﻟﺬا در هنگام اﺳﺘﻔﺎده کلیه نکات ایمنی کار ﺑﺎ ﻣﺎده ﺷﯿﻤﯿﺎیی رﻋﺎﯾﺖ ﺷﻮد.