محلول هنکس Hanks Solution

HBSS مخفف محلول نمکی متعادل شده هنکس است. محلول HBSS نمک متعادل هنکس مناسب تهیه سوسپانسیون لنفوسیتی در آزمایش های HLA، کشت سلولی و آزمایش سازگاری گلبول های سفید می باشد. لنفوسیت ها در محلول هنکس به مدت ۲ روز در دمای 2 – 4 درجه زنده می مانند. نمک های مختلف موجود در محلول هنکس مخصوصا” نمک بی کربنات سدیم، سیستم بافری مناسبی را برای حفظ محیط در محدوده pH فیزیولوژیک فراهم می کند.

محلول HBSS یا محلول نمک متعادل Hank’s (Hanks’ Balanced Salt Solution) در سال 1949 بوسیله Hanks و Wallace برای حفظ سلول ها در محیط های دارای دی اکسید کربن کم یا فاقد دی اکسید کربن ساخته شد. محیط HBSS بعنوان یک محلول نمکی متعادل و تعریف می شود و به لحاظ شیمیایی، محیطی ایجاد می کند که تمامیت فیزیولوژیکی و ساختاری سلول ها را در محیط حفظ می کند. این محصول فقط برای استفاده تحقیقاتی می باشد

بطور خلاصه، نقش یک محلول نمکی متعادل عبارت است از:

حفظ تعادل اسمزی در داخل و خارج سلول
فراهم کردن آب و یون های غیر آلی مورد نیاز برای متابولیسم سلول
فراهم کردن انرژی لازم برای متابولیسم سلول
اثر بافری برای حفظ pH فیزیولوژیک (7.2 – 7.6) در محیط

برخی از کاربردهای رایج HBSS عبارتند از:

شستشوی سلول ها و بافت ها: این محلول، برای حذف بقایای سلولی و سایر مواد از سلول ها و بافت ها قبل از انجام آزمایشات یا کشت سلولی استفاده می شود.

حفظ سلول ها در فاز زنده: می تواند برای نگهداری سلول ها در شرایط زنده در حین حمل و نقل یا ذخیره سازی استفاده شود.

آماده سازی سلول ها برای آزمایش: می تواند برای رقیق کردن سلول ها یا سوسپانسیون آنها قبل از انجام آزمایشات استفاده شود.

جداسازی سوسپانسیون سلولی: می تواند برای جداسازی انواع مختلف سلول ها بر اساس اندازه یا چگالی آنها استفاده شود.

محتویات محلول HBSS

این محلول حاوی بیکربنات سدیم و فنل رد است.
این محصول فاقد کلرید کلسیم و سولفات منیزیم است.
به این محصول می توان بافر HEPES افزود برای حفظ بهتر pH فیزیولوژیک در غلظت های مختلف می باشد. ( محلول HEPES هیدروکسیل - پیپرازین اتان سولفونیک اسید) به عنوان یک عامل بافری شیمیایی به محیط اضافه می شود.

نکات تکمیلی

به شرایط نگهداری محصول توجه کنید.
بعد از اتمام تاریخ مصرف، از محصول استفاده نکنید.
محصول را در فضای تاریک و دور از تابش نور نگهداری کنید.
محصول را در شرایط استریل استفاده کنید. (بطور مثال زیر هود لامینار)
برای اجتناب از آلودگی، در هنگام استفاده از محصول از پوشش مناسب (مانند دستکش، ماسک، و کلاه بهداشتی) استفاده کنید.
مکمل هایی مانند آنتی بیوتیک باید بصورت استریل به محیط کشت افزوده شوند. شرایط نگهداری و تاریخ مصرف محصول، با توجه به ماهیت مکمل تغییر خواهد کرد.
محیط کشت باید شفاف و عاری از هرگونه ذرات معلق باشد. در صورتی که محیط کدر بوده یا حاوی رسوب باشد از آن استفاده نکنید.
در مواردی که از این محیط کشت برای چندین نوبت استفاده می شود، توجه داشته باشید بعد از باز شدن محصول برای اولین بار، نسبت هوا به محیط افزایش خواهد یافت. بنابراین، محیط زودتر از حد انتظار قلیایی خواهد شد. توصیه می شود باقیمانده محیط در لوله های استریل 50 میلی لیتری نگهداری و درب آن را محکم ببندید. در این صورت تا تاریخ مصرف درج شده روی محصول قابل استفاده خواهد بود.

دو نوع اصلی HBSS وجود دارد:

HBSSبا کلسیم و منیزیم: این نوع برای نگهداری سلول هایی که به این یون ها نیاز دارند، مانند سلول های قلبی و عصبی، استفاده می شود.

HBSSبدون کلسیم و منیزیم: این نوع برای نگهداری سلول هایی که به کلسیم و منیزیم حساس هستند، مانند سلول های خونی، استفاده می شود.

این محلول را می توان به صورت آماده از شرکت های مختلف لوازم آزمایشگاهی خریداری کرد. همچنین می توان آن را در آزمایشگاه با حل کردن مواد تشکیل دهنده آن در آب مقطر تهیه کرد.