آلبومین سرم گاوی Bovine Serum Albumin

آلبومین سرم گاوی     Bovine Serum Albumin

آﻟﺒﻮﻣﯿﻦ گاوی22%

آنتی ﺑﺎدیﻫﺎی ﻧﺎﻗﺺ، ﻗﺎدرﻧﺪ ﺑﺎ ﺑﺮخی آنتی ژنﻫﺎی ﺧﺎص در ﻣﺮﺣﻠﻪ اول آگلوﺗﯿﻨﺎﺳﯿﻮن ترکیب ﺷﻮﻧﺪ، اﻣﺎ ﻗﺎدر ﺑﻪ تکمیل آگلوﺗﯿﻨﺎﺳﯿﻮن در ﻣﺮﺣﻠﻪ دوم ﻧﯿﺴﺘﻨﺪ. اﻓﺰودن آﻟﺒﻮﻣﯿﻦ گاوی ﺑﻪ ﺳﻮسپانسیون ﺳﻠﻮلی، باﻋﺚ ﺗﻘﻮﯾﺖ واکنش آنتی ﺑﺎدی­های ﻧﺎﻗﺺ و اﯾﺠﺎد آگلوتیناﺳﯿﻮن ﻣﺮئی می­گردد. از ﺳﻮی دیگر، آﻟﺒﻮﻣﯿﻦگاوی ﺑﺎﻋﺚ اﻓﺰاﯾﺶﺣﺴﺎﺳﯿﺖ آزﻣﻮن آنتی هیومن گلوﺑﻮﻟﯿﻦ  ﻏﯿﺮ ﻣﺴﺘﻘﯿﻢ ﻧﯿﺰ میﺷﻮد.

تکنیک جایگزینی توسط آلبومین:

1) از ﻧﻤﻮﻧﻪگلبولﻫﺎی ﻗﺮﻣﺰ+ ) (Rh  Oسوسپاﻧﺴﯿﻮن 5-2 درﺻﺪ در ﺳﺮم ﻓﯿﺰﯾﻮﻟﻮژی ﺗﻬﯿﻪ ﻧﻤﺎﯾﯿﺪ.

2) یک ﻗﻄﺮه از ﺳﻮسپاﻧﺴﯿﻮن گلبول ﻗﺮﻣﺰ آﻣﺎده را، در یک ﻟﻮﻟﻪ آزﻣﺎﯾﺶ ﺑﺮﯾﺰﯾﺪ. 2 ﻗﻄﺮه از ﺳـﺮم ﺑﯿﻤـﺎر ﺑـﻪ آن اﺿـﺎﻓﻪ کنید.

3) محتوای ﻟﻮﻟﻪ را ﺑﻪ ﻣﺪت30دﻗﯿﻘﻪ در دﻣﺎی 37درﺟﻪ ﺳﺎنتیگراد انکوبه کنید.

4) لوله را ﺑﻪ ﻣﺪت30ﺛﺎﻧﯿﻪ ﺑﺎ ﺳﺮﻋﺖ rpm 3000 سانتریفیوژ کرده، ﻣﺎﯾﻊ رویی را کاﻣﻼ ً ﺗﺨﻠﯿﻪ کنید.

5) از ﺟﺪاره ﻟﻮﻟﻪ ﺑﻪ آهستگی 1ﻗﻄﺮه ﻣﺤﻠﻮل آﻟﺒﻮﻣﯿﻦ گاوی22% ﺑﻪ رﺳﻮب ﺳﻠﻮلی اﺿـﺎﻓﻪ کنید. از تکان دادن ﻟﻮﻟـﻪ خودداری کنید.

6) مجددا ً ﻟﻮﻟﻪ را ﺑﻪ ﻣﺪت 15-10دﻗﯿﻘﻪ در دﻣﺎی37درﺟﻪ ﺳﺎنتیگراد انکوبه کنید.

7) لوله­ را ﺑﻪ آهستگی تکان داده و ﺑﺎ چشم ﻏﯿﺮ ﻣﺴﻠﺢ از ﻧﻈﺮ وﺟﻮد آگلوﺗﯿﻨﺎﺳﯿﻮن ﺑﺮرسی کنید.

تست سازگاری:

1) از ﺧﻮن ﻓﺮد ﺑﯿﻤﺎر و ﺧﻮن ﻓﺮددﻫﻨﺪه در2 ﻟﻮﻟﻪ ﻣﺠﺰا ﺳﻮسپاﻧﺴﯿﻮن 5-2 درصد ﺗﻬﯿﻪ کنید.

2) 2 قطره ﺳﺮم ﺑﯿﻤﺎر را، ﺑﻪ ﻟﻮﻟﻪای که ﺣﺎوی 1ﻗﻄﺮه ﺳﻮسپاﻧﺴﯿﻮن ﺳﻠﻮلی ﻓﺮد دﻫﻨﺪه می ­باشد، اﺿﺎﻓﻪ کنید.

3) 2 قطره ﺳﺮم ﻓﺮد دﻫﻨﺪه را ﺑﻪ ﻟﻮﻟﻪای که ﺣﺎوی 1ﻗﻄﺮه ﺳﻮسپاﻧﺴﯿﻮن ﺳﻠﻮلی ﻓﺮد ﺑﯿﻤﺎر میﺑﺎﺷﺪ، اﺿﺎﻓﻪ کنید.

4) محتوای ﻫﺮ دو ﻟﻮﻟﻪ را ﺑﻪ ﻣﺪت30دﻗﯿﻘﻪ در دﻣﺎی37درﺟﻪ انکوﺑﻪ کنید.

5) لوله ها را ﺑﻪ ﻣﺪت30ﺛﺎﻧﯿﻪ ﺑﺎ ﺳﺮﻋﺖ rpm 3000 سانتریفیوژ کرده، ﻣﺎﯾﻊ رویی را کاﻣﻼ ً ﺗﺨﻠﯿﻪ کنید.

6) از ﺟﺪاره ﻟﻮﻟﻪ ﺑﻪ آهستگی 1ﻗﻄﺮه ﻣﺤﻠﻮل آﻟﺒﻮﻣﯿﻦ گاوی ﺑﻪ رﺳـﻮب ﺳـﻠﻮلی اﺿـﺎﻓﻪ کنید. از تکان دادن ﻟﻮﻟـﻪﻫـﺎ خودداری کنید.

7) مجددا ً هر دو ﻟﻮﻟﻪ را ﺑﻪ ﻣﺪت 15-10دﻗﯿﻘﻪ در دﻣﺎی37درﺟﻪ انکوبه کنید.

8) لوله ­ها را ﺑﻪ آهستگی تکان داده و ﺑﺎ چشم ﻏﯿﺮ ﻣﺴﻠﺢ از ﻧﻈﺮ وﺟﻮد آگلوﺗﯿﻨﺎﺳﯿﻮن ﺑﺮرسی کنید.

احتیاط­های لازم در حین استفاده:

1) از اﯾﺠﺎد آﺋﺮوﺳﻞ اﺟﺘﻨﺎب ﺷﻮد.

2) در دﻣﺎی 8-2 درﺟﻪ ﺳﺎنتیگراد نگهداری شود.

3) قبل از اﺳﺘﻔﺎده ﺑﻪ ﻣﺪت ﻧﯿﻢ ﺳﺎﻋﺖ در دﻣﺎی اﺗﺎق نگهداری ﺷﻮد.

4) از ﻣﺼﺮف ﻣﻌﺮف ﺗﺎرﯾﺦ گذﺷﺘﻪ ﺧﻮدداری گردد.

5) در ﺻﻮرت ﻣﺸﺎﻫﺪه ﻫﺮ گوﻧﻪ کدورت، از ﻣﺼﺮف ﻣﻌﺮف ﺧﻮدداری ﺷﻮد.

6) اﯾﻦ ﻣﻌﺮف ﻫﺎ، ﺣﺎوی 0/1 درﺻﺪ ﺳﺪﯾﻢ آزاﯾﺪ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﺎده ﻧگهدارﻧﺪه میﺑﺎﺷﻨﺪ، ﻟﺬا در هنگام اﺳـﺘﻔﺎده کلیه نکات ایمنی کار ﺑﺎ ﻣﺎده ﺷﯿﻤﯿﺎیی رﻋﺎﯾﺖ ﺷﻮد.